معماری

رنگ امیزی میلوپراکسیداز MPO

رنگ امیزی میلوپراکسیداز MPO

این نوع رنگ امیزی برای مشاهده ناهنجاریهای سلولهای خونی بکار میرود.

مواد ووسایل و تجهیزات مورد نیاز:
بافر نرمال استون
3 و 3 دی امینوبنزیدین
بافر سورنسن فسفات
محلول هیدروژن پراکسید
هماتوکسیلین

معرف ها
فیکساتیو:بافر نرمال استون
سوبسترا:3 و 3 دی امینو بنزیدین
بافر:سورنسن فسفات
رنگ زمینه:هماتوکسیلین

ابتدا تهیه محلول کار:
مقدار 30 میلی گرم دی امینو بنزیدین را در 60 سی سی بافر سورنسن فسفات مخلوط میکنیم و سپس 120 لاندا هیدروژن پراکسید را به ان بیفزایید وخوب مخلوط کنید.

حال از خون مورد نظر که با ضد انعقاد(مثلا EDTA) ترکیب شده است گسترش شعله شمعی تهیه میکنیم.
وقتی که گسترش خشک شد انرا 30 ثانیه در بافر نرمال استون قرار میدهیم تا نمونه فیکس شود.
حال لام را زیر جریان خیلی ارام اب شستشو میدهیم و صبر میکنیم خشک شود…
در مرحله بعد لام را 10 دقیقه در محلول کار قرار میدهیم
سپس لام را خارج کرده و رنگ هماتوکسیلین را روی ان میریزیم و بعد از 10 دقیقه ماندن رنگ روی لام،انرا با جریان ملایم اب شستشو داده و صبر میکنیم خشک شود.
حال میتوانیم لام را با عدسی روغنی 100 مشاهده کنیم.

پاسخ دهید