معماری

آزمایش HbA2

اندازه گیری HbA2:

این نوع ازمایش بهترین و دقیق ترین تست برای تشخیص بتا تالاسمی مینور می باشد…
اندازه گیری درصد این هموگلوبین  بر اساس ستون کروماتوگرافی انجام میشود.
رنج نرمال:3/5-1/5 درصد است.
در تالاسمی مینور بالای  3/5 درصد است.

?مراحل کار:
۱)تهیه همولایزین
۲)اماده کردن ستون کروماتوگرافی
۳)تهیه لوله ی هموگلوبین توتال

ابتدا تهیه همولایزین:
یک لوله شیشه ای اماده میکنیم.100 لاندا خون حاوی EDTA را درون ان میریزیم.سپس 600 لاندا محلول همولایزین(R2) را به ان اضافه می کنیم و خوب لوله را تکان داده تا باهم خوب مخلوط شوند.

دوم اماده کردن ستون:
ستون کروماتوگرافی داخل جعبه محلولهای این تست وجود دارد و نیازی به تهیه ان نیست و خود شرکت ان را تولید میکند.این ستون به  شکل یک قیف است که داخلش بافر و مقداری ژل وجود دارد.
ابتدا ستون را محکم تکان میدهیم تا بافر وژل داخلش خوب مخلوط شوند.و در اخر دوباره ژل ته قیف قرار خواهد گرفت.
سپس ته ستون را شکسته و انرا درون لوله می گذاریم تا بافرش تخلیه شود.

سپس 100 لاندا از محلول همولایزین را درون ستون میریزیم و 5  دقیقه صبر میکنیم تا جذب ژل  و در ادامه تخلیه شود.
حالا ستون را برداشته و داخل یک لوله خالی میگذاریم و مقدار 3cc بافر (محلول R1) را به ارامی داخل ستون میریزیم طوری که همولایزین از سطح ژل کف ستون کنده نشود.منتظر میمانیم  تا بافر کاملا خارج شود.نام این لوله را test میگذاریم.

تهیه لوله توتال:
یک لوله بزرگ شیشه ای  را برداشته و 15 cc اب مقطر داخل ان ریخته و سپس 100 لاندا از محلول همولایزین را به ان اضافه میکنیم و مخلوط میکنیم.نام این لوله توتال خواهد بود.

انجام محاسبات
بلانک اب مقطر خواهد بود

درصد HbA2 برابر است با OD test  تقسیم بر OD  total ضربدر 20

پاسخ دهید