خانه > آزمایشگاهی > ALK (D5F3) با تفسیر به وسیله ایمونوهیستوشیمی

ALK (D5F3) با تفسیر به وسیله ایمونوهیستوشیمی

  • موارد درخواست آزمایش

تعیین واجد شرایط بودن بیمار برای درمان مهار کننده ALK در افراد مبتلا به آدنوکارسینومای ریوی، به ویژه تومورهای فاقد جهش‌های ژن EGFR و KRAS

 

  • توضیح آزمایش
  • شناسایی پروتئین‌های فیوژن یا الحاقی ALK به وسیله ایمونوهیستوشیمی با استفاده از D5F3 کلون ALK بر روی بافت توموری FFPE
  • کلون D5F3 نسبت به کلون ALK1 در شناسایی بیان پروتئین ALK در سرطان ریه، حساس‌تر است.

 

  • آزمایش‌هایی که باید مورد توجه قرار گیرند

تست بنیادی

  • ALK (D5F3) با تفسیر به وسیله ایمونوهیستوشیمی
  • آزمون غربالگری مؤثر و مقرون به صرفه برای تمامی پروتئین‌های الحاقی ALK

تست‌های مرتبط

  • شناسایی جهش KRAS
  • آزمون شناسایی جهش برای تعیین واجد شرایط بودن افراد مبتلا به آدنوکارسینوماهای ریوی به منظور دریافت درمان مهار کننده تیروزین کیناز (TKI)
  • شناسایی جهش EGFR به وسیله تعیین توالی پیرو (Pyrosequencing)
  • آزمون یگانه شناسایی جهش برای تعیین واجد شرایط بودن افراد مبتلا به آدنوکارسینوماهای ریوی به منظور دریافت درمان مهار کننده تیروزین کیناز (TKI)
  • ترانسلوکاسیون EML4/ALK به وسیله RT-PCR
  • به عنوان تک آزمون جهت شناسایی جهش برای تعیین واجد شرایط بودن افراد مبتلا به آدنوکارسینوماهای ریوی به منظور دریافت درمان مهارکننده ALK، توصیه نمی‌شود.
  • پانل بازتابی جهش سرطان ریه
  • به عنوان تست بازتابی برای تعیین واجد شرایط بودن افراد مبتلا به آدنوکارسینوماهای ریوی به منظور دریافت درمان مهار کننده ALK یا TKIs، توصیه نمی‌شود.
  • این پانل شامل تست مقرون به صرفه و حساس ایمونوهیستوشیمی ALK نمی‌شود.
  • الگوی بازتاب
  • اگر جهش KRAS شناسایی نشود، سپس تست جهش EGFR انجام می‌گیرد.
  • اگر جهش EGFR شناسایی نشود، تست ترانسلوکاسیون EML4/ALK انجام می‌گیرد.
  • شناسایی جهش EGFR با بازتاب به ترانسلوکاسیون EML4/ALK به وسیله RT-PCR
  • تست بازتابی برای تعیین واجد شرایط بودن افراد مبتلا به آدنوکارسینوماهای ریوی به منظور دریافت درمان مهارکننده ALK یا TKIs، توصیه نمی‌شود.
  • این پانل شامل تست مقرون به صرفه و حساس ایمونوهیستوشیمی ALK نمی‌شود.
  • الگوی بازتاب
  • اگر جهش EGFR شناسایی نشود، تست ترانسلوکاسیون EML4/ALK انجام می‌گیرد.

 

  • مروری بر بیماری

شیوع بیماری

  • سرطان ریه دومین سرطان شایع در ایالات متحده امریکاست.
  • شایع‌ترین دلیل مرگ و میر مرتبط با سرطان در زنان و مردان

مسائل مربوط به درمان

  • سرطان ریه نسبت به عوامل شیمی درمانی قدیمی، کمتر پاسخ می‌دهد.
  • 5 سال استفاده از این عوامل نتایج ملال انگیزی به همراه داشته است.
  • بیماران انتخاب شده پاسخ بهتری به داروهای جدیدتر دادند.
  • نرخ پاسخ تومور و نتایج بالینی بیمار در سرطان ریه سلول غیر کوچک (به ویژه زیر گروه آدنو)، ارتباط مستقیمی با وضعیت جهش تومور دارد.
  • شامل جهش‌های KRAS، ALK و EGFR می‌شود.
  • بازآرایی‌های ALK (ALK Rearrangements)
  • در حدود 7% از آدنوکارسینوماهای ریوی گزارش شده است.
  • حدود 30% از بیماران جوان تر، مرد، غیر سیگاری یا سیگاری با مصرف اندک هستند.
  • بازآرایی‌های ALK میزان پاسخ به ALK TKIs (برای مثال، کریزوتینیب) را پیش‌بینی می‌کنند.
  • روش‌های شناسایی بازآرایی‌های ALK
  • RT-PCR: ممکن است که تمامی الحاق یا هم جوشی‌های ALK را شناسایی نکند.
  • :FISH بعلت وجود وارونگی‌های کوچک در کروموزوم 2p (2p21 و 2p23)، تفسیر تکنیک FISH برای این بازآرایی‌ها چالش برانگیز است.
  • ایمونوهیستوشیمی (IHC)، بیان پروتئین را شناسایی می‌کند.
  • پروتئین شناسایی شده، جانشین الحاق یا هم‌جوشی است.
  • زمانی که این تست با PCR یا FISH مقایسه می‌شود، مؤثرتر و مقرون به صرفه‌تر است.

 

  • ژنتیک

ژن ALK

ساختار/ عملکرد

  • نقطه انفصال یا شکست در اگزون 20 دومین کیناز سرطان ریه، با ژن شریک
  • رایج‌ترین شریک الحاق، EML-4 است.
  • دیگر شرکای الحاق، ژن‌های KIF5B، KLC1 هستند.
  • الحاق ژن ALK با شریکش، الیگومریزاسیون مستقل از لیگاند ALK را میانجیگری می‌کند که منجر به فعال سازی کیناز ALK می‌گردد.
  • اپیتوپ D5F3 درون C-ترمینال پروتئین ALK قرار گرفته و در تمامی جابجایی‌ها یا ترانسلوکاسیون‌ها حفظ می‌شود.
  • تمامی ترانسلوکاسیون‌ها باید با ایمونوهیستوشیمی شناسایی گردند.

 

  • تفسیر آزمایش

نتایج مثبت

  • هر درجه‌ای از رنگ‌آمیزی سیتوپلاسمیک بیشتر یا مساوی 10% سلول‌های توموری، مثبت در نظر گرفته می‌شود.
  • حضور این جهش می‌تواند پاسخ بیمار به مهارکننده ALK را پیش‌بینی کند.
  • بیماران دارای این جهش معمولاً فاقد جهش‌های ژن‌های EGFR و KRAS هستند.

 

  • محدودیت‌های تست
  • نتایج این تست باید در چارچوب داده‌های مورفولوژیکی یا ریخت شناسی و دیگر داده‌های مرتبط، تفسیر گردند.
  • این تست را نباید به تنهایی برای تشخیص بدخیمی مورد استفاده قرار داد.