تست CAMP
شناسایی و افتراق استرپتوکوک گروه B (آگالاکتیه) از سایر استرپتوکوکها
۲- اساس آزمایش:
استرپتوکوک گروه B پروتئین خارج سلولی به نام CAMP factor ترشح می نماید که با بتا لیزین استافیلوکوک اورئوس بصورت سینرژیک عمل نموده و سبب افزایش لیز گلبول های قرمز خون می شود.
- حساسیت این تست بسیار بالا است و حتی سویه های بدون همولیز استرپتوکوک گروه B (در۱۱ % موارد)، CAMP مثبت می باشند.
۳- نمونه اولیه:
– کشت تازه میکروبی ( ۲۴-۱۸ ساعته )
۴- مواد و ابزار لازم:
- پلیت بلاد آگار حاوی ۵% خون گوسفند
- استافیلوکوک اورئوس بتا همولیتیک ATCC (25923 ) یا استاف اورئوس بتا همولیتیک جدا شده از بیمار
۵- روش انجام کار:
- ابتدا در وسط پلیت بلادآگار یک خط مستقیم از استافیلوکوک اورئوس مولد بتا لیزین راکشت می دهیم.
- سپس استرپتوکوک مورد نظر را عمود بر خط کشت استافیلوکوک اورئوس کشت داده بطوریکه این دو با هم برخورد و تداخل نکنند (می توان چند میکروار گانیسم را به فاصله ۴-۳ میلی متر کشت داد).
- پلیت را به مدت ۲۴-۱۸ ساعت در اتوو C ۳۵۰ در حضور O2 انکوبه می نماییم.
- مشاهده همولیز بتا، شبیه نوک فلش، در محلی که دو سویه استافیلوکوک اورئوس و سویه مشکوک به هم نزدیک می شوند، نشان دهنده تشدید همولیز بتا و تست CAMP مثبت است.
۶- تداخلات:
اگر پلیت تست در کندل جار یا اتو CO2 و یا در شرایط بی هوازی انکوبه شود بعضی از استرپتوکوک های گروه A ایجاد واکنش CAMP مثبت می کنند، بنابراین پلیت تست، باید حتماً در حضور O2 اتوو گذاری شود.
۷- برنامه QC:
سویه کنترل مثبت: استرپتوکوک گروه B
سویه کنترل منفی: استرپتوکوک گروه A و استرپتوکوک بوویس