معماری
رنگ آمیزی فلاژل

رنگ امیزی فلاژل

رنگ امیزی فلاژل
فلاژل باکتریایی دارای ضخامت بسیار کمی بوده و به همین جهت به سختی میتوان انرا زیر میکروسکوپ مشاهده کرد.پس باید ابتدا برای فلاژل ضخامت کافی ایجاد کنیم.این امر با استفاده کردن از فوشین و اسید تانیک ممکن خواهد شد.

تهیه محلولهای لازم

محلول A

مواد لازم
فوشین قلیایی:0.6 گرم
الکل اتیلیک95%:50 سی سی
ابتدا الکل را با فوشین مخلوط کنید
حال این محلول را به مدت 12 ساعت  در سطح یک همزن مغناطیسی قرار میدهیم تا فوشین و الکل کاملا باهم مخلوط شوند.

محلول B

مواد لازم
سدیم کلراید:0.37 گرم
اسید تانیک:0.75 گرم
اب مقطر:50 سی سی
این مواد را کاملا باهم مخلوط کنید تا محلول ما اماده شود.

محلول A و B را باهم مخلوط کنید
با استفاده از سود نرمال،ph محلول را به 5 برسانید.(استفاده از ph متر)

محلول را در ظروف قهوه ای درب دار ذخیره نمایید
3 روز قبل از استفاده باید محلول را در یخچال قرار دهیم
این محلول در یخچال 1 ماه ودر فریزر 1 سال قابل نگهداری است اما در دمای اتاق فاسد خواهد شد.
هنگام مصرف،از رسوب ته ظرف استفاده نکنید و فقط مایع رویی را جهت رنگ امیزی بکار ببرید.

دقت کافی داشته باشید که جهت رنگ امیزی فلاژل لام مورد استفاده باید کاملا تمیز باشد.بدین منظور ابتدا لام را درون اسید استیک 3% و سپس درون اتانول 95% فرو برده و خارج کنید.
حال لام را با اب لوله کشی شستشو دهید
سپس لام را با اب مقطر کاملا و تمیز شستشو دهید
اجازه دهید لام خشک شود
حال لام را چند بار  روی قسمت ابی شعله قرار دهید تا کاملا تمیز شود.
حالا یک مداد مومی بردارید
روی لام یک مستطیل بزرگ رسم کنید
یک قطره بزرگ اب مقطر را درون این مستطیل قرار دهید
مقدار کمی از کلنی باکتری را با استفاده از لوپ یا انس استریل برداشته و با اب مقطر روی لام کاملا مخلوط کنید

حال اجازه دهید لام در مجاورت هوا خشک شود
نباید از حرارت جهت فیکس کردن استفاده کنید
حال یک سی سی از محلولی که ساخته اید(محلول  A+محلولB) را روی گسترش باکتریایی بریزید.
بعد از 5 تا 15 دقیقه رسوبی قرمز رنگ را مشاهده خواهید کرد
در مرحله بعد لام را به ارامی با اب مقطر شستشو دهید
لام را بصورت افقی روی سطح قرار دهید تا در مجاورت هوا خشک شود.
حال میتوانید لام را با استفاده از عدسی روغنی 100مشاهده کنید.

رنگ آمیزی فلاژل

پاسخ دهید