معماری

کاتالاز

  • تشخیص استافیلوکوک و میکروکوک ( کاتالاز مثبت ) از استرپتوکوک ( کاتالاز منفی )
  • افتراق کلستریدیوم از باسیلوس ها ( کاتالاز مثبت )
  • افتراق لیستریامونوسیتوژنز ( کاتالاز مثبت ) از استرپتوکوک بتاهمولیتیک

۲-  اساس آزمایش:

کاتالاز آنزیمی است که H2O2  را به آب و اکسیژن تجزیه می کند. H2O2  یکی از محصولات نهایی اکسیداسیون در متابولیسم کربوهیدرات است.

 

۳-  نمونه اولیه:    

کشت  ۲۴-۱۸ ساعته از ارگانیسم مورد نظر

 

۴-  مواد و تجهیزات مورد نیاز: 

  • پراکسید هیدروژن ۳% ( این ماده باید در شیشه های قهوه ای یا تیره رنگ ودر یخچال نگهداری شود )
  • اپلیکاتور چوبی یا شیشه ای یا لوپ پلاتینی
  • لام شیشه ای

 

۵-  مراحل انجام کار:

  • با یک اپلیکاتور چوبی از مرکز یک کلنی به سطح لام شیشه ای منتقل کنید.
  • یک قطره H2O2 را بلافاصله به کلنی روی لام  اضافه کنید و ا یجاد حباب روی لام را بررسی نمایید. نتیجه را به صورت مثبت یا منفی گزارش کنید.
  • ایجاد حباب های سریع و ماندگار با حالت جوش زدن ( کف ) نشانگر مثبت بودن تست است.

 

۶-  برنامه QC:

پراکسید هیدورژن باید هر روز یا قبل از تست نمودن باکتری مجهول با سوش های کنترل مثبت و منفی تست شود.

سوش کنترل مثبت : Staphylococcus. aureus

سوش کنترل منفی  : Streptococcus. pyogenes

 

۷-  تداخلات :

  • جهت تست کاتالاز باید از روی محیطی کلنی برداشته شود که فاقد خون باشد. زیرا گلبول های قرمز واکنش کاتالاز مثبت ضعیف ایجاد می کنند. اما از آنجائی که اکثر نمونه های کلینیکی روی محیط های خون دار کشت داده می شوند، برای انجام تست میتوان نمونه را از قله کلنی ها بدون تماس با محیط برداشت تا واکنش مثبت کاذب ایجاد نشود.
  • بهتر است از یک اپلیکاتور چوبی برای برداشتن کلنی استفاده شود. استفاده از لوپ آهنی واکنش مثبت کاذب ایجاد می کند.
  • از آنجائی که بعضی از باکتری ها دارای آنزیم هایی غیر از کاتالاز هستند که موجب تجزیه پراکسیدهیدروژن می شود، ایجاد حباب های ریز به تعداد کم، بعد از ۳۰ – ۲۰ ثانیه به معنی واکنش مثبت نمی باشد.

پاسخ دهید