تعيين آنتي ژنهاي ضعيف d در بيماران du مثيت
تجهيزات: لوله شيشه اي –آنتي سرم d -آنتي هيومن-سانتريفوژ-نمونه خون EDTA دار بيمار- ميكروپيپت 50لاندا -پيپت 1cc – ماژيك -سرم فيزيولوژي
روش انجام كار:
1-لوله شيشه اي را به عنوان سوسپانسيون 5-2% علامتگذاري نمائيد.
2-توسط پيسيت 1cc سرم فيزيولوژي اضافه نمائيد.
3-50 لاندا از سرم فيزيولوژي را برداشته و 50 لاندا خون بيمار را به آن اضافه نمائيد.
4-لوله ديگري را به نام d نامگذاري نمائيد و 50 لاندا از سوسپانسيون 5-2% را به آن اضافه نمائيد.
5-به لوله d به ميزان 50 لاندا يا يك قطره از آنتيd اضافه نمائيد.
6-محتويات لوله را به آرامي مخلوط نمائيد.
7-لوله نمونه را در دور rpm1000 به مدت 15-30 ثانيه سانتريفيوژ نمائيد.
8-با زدن ضربه آرامي به انتهاي لوله RBCها را به حالت سوسپانسيون در آورده و از نظر اگلوتيناسيون بررسي نمائيد.
9-در صورت عدم وجود اگلوتيناسيون مراحل كاري را به شرح ذيل ادامه دهيد.
10-لوله d را به مدت نيم ساعت در 37 درجه قرار دهيد.
11-لوله d را با اضافه نمودن 1cc سرم فيزيولوژي شستشو دهيد.
12-آن را در دور 2000 به مدت 1 دقيقه سانتريفيوژ نمائيد.
13-محلول رويي را خالي نمائيد.
14-عمليات شستشو را دو مرتبه ديگر تكرار نمائيد.
15-در مرحله آخر شستشو بعد از خالي كردن محلول رويي ، 2 قطره آنتي هيومن به آن اضافه نمائيد.
16-لوله d را به مدت 30 ثانيه با دور rpm1000 سانتريفيوژ نمائيد.
17-با زدن ضربه آرامي به انتهاي لوله و ايجاد سوسپانسيون RBC لوله را از نظر وجود اگلوتيناسيون بررسي نمائيد.
تفسير نتايج:
نتايج مثبت: حضور اگلوتيناسيون
نتايج منفي: عدم وجود اگلوتيناسيون